植物酚氧化酶（PO）酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒

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本试剂仅供科研使用，不得用于医学诊断

实验目的：

本试剂盒用于检测植物相关样本中酚氧化酶（PO）的含量。

试剂盒组成：

操作步骤：

1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。

8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项：

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。

7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 本试剂不同批号组分不得混用。

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规格说明

对于重量小于数百毫克的小包装产品，正确的分装方法是将样品溶于一定体积的溶剂或缓冲液中后，再进行分装。对于用户用称量方法分装后发现缺量的投诉，本公司恕不受理。

一、客户群体
1、没有时间和精力完成ELISA实验测定的客户。
2、缺乏ELISA操作经验和技巧的客户。

二、代测指标
除了极少数冻存状态下不稳定的指标外，网站上最新列出的所有指标都可以代测，具体请咨询销售。

酶联免疫（ELISA）

备注说明：武汉吉立德生物提供的检测只针对于实验科研用户，不作为临床诊断依据，结果仅供参考。客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

三、样本要求

1、提供拟代测样品情况，包括样品的性质与数量、是否包含重复、有无特殊的化学处理、保存条件与保存时间和测定指标等，特别珍贵的样品请提前声明。
2、按照要求，确保样品标签和数量无误，进行适当包装和寄送，以确保寄送过程中样品不变质。
3.我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装并放在-20℃或-80℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。

4.液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

收集样本前须向我司销售人员索要说明书以及具体操作注意事项。

四、寄标本时需注明以下情况：
1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、联系方式；4、实验后标本是否寄回。

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